Kính hiển vi tương phản pha
Nhiều đối tượng sinh học được quan tâm bao gồm các cấu trúc tế bào như nhân gần như trong suốt; chúng truyền nhiều ánh sáng như phương tiện lắp đặt xung quanh chúng. Vì không có màu sắc hoặc độ tương phản truyền qua trong một vật thể như vậy, nên không thể quan sát cấu trúc bằng kính hiển vi quang học thông thường.
Tuy nhiên, RI của cấu trúc tế bào thay đổi một chút so với vật liệu xung quanh, và có thể khai thác sự khác biệt này. Sự truyền ánh sáng qua một vật thể như vậy tạo ra sự thay đổi về đường quang học qua vật thể, cũng như dẫn đến sự thay đổi pha của ánh sáng truyền qua cấu trúc được quan tâm so với ánh sáng truyền xung quanh cấu trúc. Thông tin chuyển pha này có thể được sử dụng để tạo thành một hình ảnh nhìn thấy được nếu nó được chuyển đổi thành các biến thể cường độ mà người quan sát có thể phát hiện được. Nhà vật lý người Hà LanFrits Zernike đã phát triển một phương pháp để làm điều đó vào năm 1934. (Ông đã giành giải Nobel Vật lý năm 1953 cho phát minh của mình.) Trong một kính hiển vi tương phản pha, độ lệch pha giữa ánh sáng bị nhiễu xạ bởi mẫu vật và ánh sáng trực tiếp và undeflected là một phần tư bước sóng hoặc nhỏ hơn. Bằng cách đặt một mặt nạ thích hợp trong mặt phẳng tiêu cự phía sau của vật kính để cung cấp khả năng lọc chọn lọc ánh sáng nhiễu xạ, Zernike đã tăng độ lệch pha này thêm một phần tư bước sóng. Các sóng khác pha nhau bằng nửa bước sóng sẽ triệt tiêu lẫn nhau. Ở những nơi trong ảnh pha xảy ra hiện tượng này, không có ánh sáng nào truyền qua. Kết quả là, sự khác biệt về pha gây ra bởi các biến thể trong mẫu vật xuất hiện dưới dạng các biến thể cường độ trong ảnh.
Có một số cách tiếp cận để đạt được hình ảnh chất lượng tốt bằng kỹ thuật này. Một trong những cách phổ biến nhất là việc sử dụng nguồn sáng hình khuyên được chụp trên mặt nạ hình khuyên ở mặt phẳng tiêu cự phía sau. Các kỹ thuật khác sử dụng các cạnh, các chấm nhỏ hoặc các kết hợp khác giữa hình dạng nguồn và hình dạng mặt nạ.
Tuy nhiên, RI của cấu trúc tế bào thay đổi một chút so với vật liệu xung quanh, và có thể khai thác sự khác biệt này. Sự truyền ánh sáng qua một vật thể như vậy tạo ra sự thay đổi về đường quang học qua vật thể, cũng như dẫn đến sự thay đổi pha của ánh sáng truyền qua cấu trúc được quan tâm so với ánh sáng truyền xung quanh cấu trúc. Thông tin chuyển pha này có thể được sử dụng để tạo thành một hình ảnh nhìn thấy được nếu nó được chuyển đổi thành các biến thể cường độ mà người quan sát có thể phát hiện được. Nhà vật lý người Hà LanFrits Zernike đã phát triển một phương pháp để làm điều đó vào năm 1934. (Ông đã giành giải Nobel Vật lý năm 1953 cho phát minh của mình.) Trong một kính hiển vi tương phản pha, độ lệch pha giữa ánh sáng bị nhiễu xạ bởi mẫu vật và ánh sáng trực tiếp và undeflected là một phần tư bước sóng hoặc nhỏ hơn. Bằng cách đặt một mặt nạ thích hợp trong mặt phẳng tiêu cự phía sau của vật kính để cung cấp khả năng lọc chọn lọc ánh sáng nhiễu xạ, Zernike đã tăng độ lệch pha này thêm một phần tư bước sóng. Các sóng khác pha nhau bằng nửa bước sóng sẽ triệt tiêu lẫn nhau. Ở những nơi trong ảnh pha xảy ra hiện tượng này, không có ánh sáng nào truyền qua. Kết quả là, sự khác biệt về pha gây ra bởi các biến thể trong mẫu vật xuất hiện dưới dạng các biến thể cường độ trong ảnh.
Có một số cách tiếp cận để đạt được hình ảnh chất lượng tốt bằng kỹ thuật này. Một trong những cách phổ biến nhất là việc sử dụng nguồn sáng hình khuyên được chụp trên mặt nạ hình khuyên ở mặt phẳng tiêu cự phía sau. Các kỹ thuật khác sử dụng các cạnh, các chấm nhỏ hoặc các kết hợp khác giữa hình dạng nguồn và hình dạng mặt nạ.
Không có nhận xét nào